滴滴涕对人大肠癌DLD1细胞上皮间充质转化的影响

摘要：目的探究滴滴涕（DDT）对人结直肠腺癌上皮细胞（DLD1）上皮间充质转化的影响及机制。方法DLD1细胞用DDT 0.01,0.1,1.0,10.0和100.0 nmol·L^-1处理48 h后,倒置显微镜下观察细胞形态;实时荧光定量PCR法检测E-钙黏着蛋白、N-钙黏着蛋白、波形蛋白和锌指转录因子Snail1的mRNA表达。Western蛋白质印迹法检测信号转导和转录激活因子3（STAT3）信号通路主要蛋白STAT3和p-STAT3的蛋白水平。用STAT3抑制剂WP1066（5μmol·L^-1）处理,通过Western印迹法和实时荧光定量PCR法检测其对DDT诱导的STAT3/Snail1信号通路中p-STAT3、STAT3的蛋白水平和上皮间充质转化关键因子E-钙黏着蛋白、N-钙黏着蛋白、波形蛋白和锌指转录因子Snail1的mRNA水平的影响。结果与正常对照组相比,DLD1细胞在DDT处理48 h后,细胞形态由卵圆形逐渐变为长梭形,E-钙黏着蛋白mRNA相对表达显著降低（P〈0.01）,为正常对照组的（42.4±2.8）%。N-钙黏着蛋白和波形蛋白mRNA相对表达显著提高（P〈0.01）,为正常对照组的1.91±0.1倍和（1.5±0.2）倍。STAT3信号通路蛋白STAT3和p-STAT3蛋白表达均升高（P〈0.01）,为正常对照组的2.1和1.8倍。锌指转录因子Snail1的mRNA相对表达显著升高（P〈0.01）,是正常对照组的（1.5±0.1）倍。STAT3抑制剂WP1066 5μmol·L^-1处理后,锌指转录因子Snail1 mRNA的表达明显下调（P〈0.01）,为DDT 1.0 nmol·L^-1处理组的（56.3±0.9）%,同时抑制DDT诱导的E-钙黏着蛋白mRNA表达升高（P〈0.01）,为DDT 1.0 nmol·L^-1处理组的2.5±0.1倍,N-钙黏着蛋白和波形蛋白mRNA表达降低（P〈0.01）,分别为DDT 1.0 nmol·L^-1处理组的（50.2±2.9）%和（61.6±6.1）%。结论 DDT可能通过STAT3/Snail1信号通路改变上皮间充质转化子E-钙黏着蛋白、N-钙黏着蛋白和波形蛋白的表达,进而促进大肠癌细胞上皮间充质转化。