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1 《中国药理学与毒理学杂志》为军事医学科学院毒物药物研究所、中国药 理学会和中国毒理学会共同主办的学术性刊物,双月刊,国内外公开发行。编辑部设在军事医学科学院毒物药物研究所。本刊是中国中文核心期刊
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铅暴露对神经胶质瘤细胞铜代谢的影响及其机制
作者: 张洁琼 ; 于海波 ; 宋晗 ; 陈景元 ; 骆文静 ; 郑刚
关键词: 铅 铜代谢 铜转运蛋白1 铜转运ATP酶α肽
摘要:目的:研究铜转运蛋白1(CTR1)、铜转运 ATP 酶α多肽(ATP7A)在铅暴露诱导大鼠 C6胶质瘤细胞铜离子代谢紊乱及氧化应激反应中的作用。方法采用噻唑蓝法(MTT),通过 C6细胞暴露于醋酸铅0~100μmol·L -124和48 h 筛选适合剂量。C6细胞用醋酸铅10μmol·L -1分别处理24和48 h 后,分别采用黄嘌呤氧化酶法和硫代巴比妥酸比色法(TBA)检测铅对细胞 SOD 活性和 MDA 含量;原子吸收分光光度法观察铅对细胞内铜水平;荧光实时定量 PCR 和 Western blot 分别检测铅暴露后细胞 CTR1和ATP7A 的 mRNA 和蛋白表达水平的变化。结果醋酸铅浓度高于10μmol·L -1时,细胞活力受到显著抑制,故选择铅10μmol·L -1为铅暴露浓度。与正常对照组相比,单独铅或铜处理组 SOD 活性下降,MDA 含量增高,而铅与铜联合处理组 SOD 活性下降及 MDA 含量增高的程度更加显著(P <0.01)。与正常对照组比较,醋酸铅10μmol·L -1处理 C6细胞24和48 h 后,细胞对铜的吸收量分别增加1.2倍和2.5倍(P <0.01),CTR1 mRNA 水平分别增高23.2%和58.7%(P <0.01),而 ATP7A mRNA 水平分别下调58.1%和50.0%(P <0.01)。与正常对照组比较,醋酸铅10μmol·L -1暴露组 CTR1蛋白水平显著增高,而ATP7A 蛋白表达降低(P<0.01)。结论铅暴露可以导致细胞中铜的蓄积和氧化应激反应的增强,其分子机制可能与影响 C6细胞 CTR1和 ATP7A 的表达水平有关。
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