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1 《中国药理学与毒理学杂志》为军事医学科学院毒物药物研究所、中国药 理学会和中国毒理学会共同主办的学术性刊物，双月刊，国内外公开发行。编辑部设在军事医学科学院毒物药物研究所。本刊是中国中文核心期刊
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细胞内钙稳态失调在腺苷致肝癌 HepG2 细胞凋亡的作用
作者: 张庆华 [1] ; 项梦琦 [1] ; 郭益添 [1] ; 叶艳清 [1] ; 蒲泽锦 [1] ; 冯家琳 [2] ; 吴灵飞 [1]
关键词: 腺苷 肝癌 HepG2细胞 细胞凋亡 钙离子 线粒体膜电位
摘要：目的 探讨腺苷诱导人肝癌HepG2细胞凋亡及其与Ca2＋相关的机制。方法 CCK8法测定腺苷1.0，2.0，4.0和6.0 mmol·L-1分别作用24，36和48 h后对HepG2细胞存活的抑制率。腺苷1.0，2.0和4.0 mmol·L-1作用24 h后，AnnexinⅤ-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率，双波长荧光分光光度法和激光共聚焦检测细胞内游离Ca2＋浓度，流式细胞术检测细胞内线粒体膜电位，实时荧光定量PCR及Western蛋白质印迹法分别检测m-钙蛋白酶、胱天蛋白酶4、Bax、Bak、胱天蛋白酶3基因和蛋白的表达。结果 腺苷可显著抑制HepG2细胞的增殖，呈浓度和时间依赖性；随腺苷浓度由1.0，2.0增加到4.0 mmol·L-1，细胞凋亡率分别由（20.30±1.23）%和（28.50±2.32）%增至（38.10±4.09）%，并伴有细胞内游离Ca2＋浓度增加1.17±0.02，1.28±0.03和（1.49±0.04）倍，以及线粒体膜电位下降，由703± 53分别降至504±34，315±27和124±10（P〈0.01），同时m-钙蛋白酶、胱天蛋白酶4、Bax、Bak、胱天蛋白酶3 mRNA及蛋白表达水平明显增高（P〈0.05）。结论 腺苷可通过提高细胞游离Ca2＋水平，激活钙依赖蛋白，并激活内源性内质网应激胱天蛋白酶4信号转导途径而诱导HepG2细胞凋亡。