知母皂苷元通过上调PI3K/Akt信号通路减轻淀粉样β蛋白诱导的乳大鼠海马神经元突触损伤

摘要：目的探讨知母皂苷元（Sar）减轻淀粉样β蛋白（Aβ）诱导的海马神经元突触损伤的信号转导机制。方法取出生0～24 h SD乳大鼠海马神经元,体外培养7 d。海马神经元分别加入磷脂酰肌醇-3-激酶（PI3K）特异性阻断剂LY294002 30μmo.lL-1或蛋白激酶B（Akt）特异性阻断剂曲西立滨1μmol.L-11 h后,加Sar 30和100μmo.l L-1作用1 h,再加Aβ1-4250 nmo.l L-1作用24 h。应用突触囊泡蛋白（SYP）免疫荧光染色观察突触的改变。Western蛋白质印迹法检测海马神经元SYP、磷酸化Akt（p-Akt）和磷酸化糖原合成酶3β（p-GSK3β）表达水平的改变。结果与正常对照组相比,Aβ1-42组培养的海马神经元SYP,p-Akt和p-GSK3β表达水平明显减低（P〈0.01）。与Aβ1-42组相比,Aβ1-42＋Sar 30和100μmo.l L-1组海马神经元SYP,p-Akt和p-GSK3β表达水平明显增加（P〈0.01）。给予LY294002作用后,SYP和p-Akt表达水平明显降低（P〈0.05）。给予曲西立滨作用后,SYP和p-GSK3β表达水平明显降低（P〈0.05）。单独给予LY294002,海马神经元SYP表达无变化,p-Akt表达水平明显降低（P〈0.01）。单独给予曲西立滨,海马神经元SYP和p-GSK3β蛋白表达水平明显降低（P〈0.01）。结论 Sar通过上调PI3K/Akt/GSK3β信号通路对抗Aβ1-42诱导的海马神经元突触损伤。