知母皂苷元改善淀粉样β蛋白引起的体外培养乳大鼠海马神经元的损伤

摘要：目的探讨知母皂苷元（Sar）对淀粉样β蛋白片段1-42（Aβ1-42）引起的海马神经元损伤是否有保护作用。方法取出生24 h内SD乳大鼠海马神经元,体外培养7 d,先加入Sar 10,30和100μmo.lL-1作用1 h,然后加入Aβ1-4250 nmo.l L-1作用24 h。应用倒置相差显微镜和微管相关蛋白2（MAP2）免疫荧光染色观察神经元树突的生长;应用Hoechst33258核染色检测神经元凋亡;Western蛋白质印迹法检测海马神经元突触囊泡蛋白（SYP）、突触后致密蛋白95（PSD95）和活性胱天蛋白酶3表达。结果加入Aβ1-42作用24 h,可使培养海马神经元树突静脉曲张样改变和突起回缩,树突总长度和末梢分枝数明显减少。与正常对照组相比,SYP和PSD95蛋白表达水平明显降低（P〈0.01）,神经元凋亡细胞百分率和活性胱天蛋白酶3蛋白表达水平明显升高（P〈0.01）。与Aβ1-42模型组相比,先分别加入Sar 30和100μmo.lL-1可明显对抗Aβ1-42引起的这些改变,培养海马神经元树突总长度（μm）和末梢分枝数从277±76和6±2分别增加到359±144和8±3以及370±158和8±3,神经元SYP和PSD95蛋白表达水平明显增加（P〈0.01）,神经元凋亡细胞百分率和活性胱天蛋白酶3表达水平明显降低（P〈0.01）。结论 Sar能够改善Aβ1-42引起的海马神经元损伤。