对乙酰氨基酚通过过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子1α信号通路影响HepaRG细胞线粒体新生

摘要：目的探讨对乙酰氨基酚（APAP）对HepaRG细胞过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子1α（PGC-1α）信号通路介导的线粒体新生的影响。方法接种HepaRG细胞并给予生长培养基,待细胞长满后,替换为分化培养基进行诱导分化,每天观察细胞形态并拍照。APAP（0.125,0.25,0.5,1,2,4,8和12 mmol·L^-1）处理诱导分化后的HepaRG细胞24和48 h,MTT法测定细胞存活率。Western蛋白印迹法检测细胞线粒体新生相关蛋白PGC-1α、核呼吸因子2（NRF-2）和线粒体转录因子A（TFAM）,以及线粒体构成蛋白NADH脱氢酶亚基1（ND-1）的表达。结果诱导分化后显微镜下可见肝细胞样和胆管细胞样2种形态的细胞。与正常对照组相比,APAP作用24和48 h后,随APAP浓度的增加,细胞存活率不断降低,其IC_（50）分别5.64和2.65 mmol·L^-1。与正常对照组相比,APAP作用24 h,0.5,1,2和4 mmol·L^-1组PGC-1α表达水平显著增加（P〈0.01）,8 mmol·L^-1组显著降低（P〈0.01）;0.5 mmol·L^-1组NRF-2表达水平显著增加（P〈0.05）,2,4和8 mmol·L^-1组显著降低（P〈0.01）;1 mmol·L^-1组TFAM表达水平显著增加（P〈0.05）,4和8 mmol·L^-1组显著降低（P〈0.01）;0.5,1,2和4 mmol·L^-1组ND-1表达水平显著增加（P〈0.01）,8 mmol·L^-1组显著降低（P〈0.01）。结论 APAP可诱导或抑制HepaRG细胞的线粒体新生,其机制可能与PGC-1α通路蛋白表达有关。