脱氢枞胺对氟苯甲醛激活JNK/P38通路诱导人肝癌HepG2细胞凋亡

摘要：目的研究脱氢枞胺对氟苯甲醛（DHAA-F）对人肝癌Hep G2细胞存活的影响,探讨其诱导细胞凋亡作用机制。方法用不同浓度DHAA-F处理Hep G2细胞24,48和72 h,CCK-8法检测细胞存活;DHAA-F20,40和80μmol·L~（-1）处理Hep G2细胞24 h,荧光显微镜观察细胞形态的变化,Annexin V-FITC/PI双染检测细胞凋亡,Western蛋白印迹法检测凋亡相关蛋白BCL-2、BAX、活化的胱天蛋白酶9和胱天蛋白酶3蛋白表达水平,以及丝裂原激活蛋白激酶（MAPK）家族中ERK,JNK和P38蛋白的表达。结果与细胞对照组比较,DHAA-F可显著抑制细胞存活（P〈0.01）,24,48和72 h的IC50值分别为56.8±4.4,40.2±3.4和24.2±2.4μmol·L~（-1）;DHAA-F 20,40和80μmol·L~（-1）作用24 h后,核固缩程度加深,PI染色增多,细胞凋亡率明显增加（P〈0.01）,由细胞对照组的（6.4±0.6）%分别增加至（12.3±1.7）%,（28.8±3.2）%和（61.8±4.6）%;DHAA-F可以增加Hep G2细胞中JNK和P38蛋白的磷酸化（P〈0.01）,引起BCL-2表达下调（P〈0.01）、BAX及活化的胱天蛋白酶9和胱天蛋白酶3表达上调（P〈0.01）;与DHAA-F组相比,P38MAPK抑制剂SB203580和JNK抑制剂SP600125可逆转DHAA-F引起的BCL-2表达下调、BAX表达上调和胱天蛋白酶3的活化（P〈0.01）。结论 DHAA-F可通过激活JNK/P38通路诱导人肝癌Hep G2细胞发生凋亡。