怀牛膝果寡糖对H1N1流感疫苗佐剂活性及免疫细胞功能的影响

摘要：目的研究牛膝果寡糖ABP-50-FOS对H1N1流感疫苗的佐剂活性及免疫细胞功能的影响。方法采用凝胶渗透色谱、毛细管电泳、红外光谱和核磁共振等方法研究ABP-50-FOS的理化性质;BALB/c小鼠肌肉注射H1N1流感疫苗3μg和ABP-50-FOS 200μg初次免疫,28 d后加强免疫。分别于初次和再次免疫后14 d用ELISA法检测小鼠血清特异性Ig G,Ig G1,Ig G2a,Ig G2b,Ig G3和Ig M抗体水平;流式细胞仪测定脾细胞中CD3^＋,CD19^＋,CD4^＋和CD8^＋淋巴细胞亚群百分率;MTT法测定小鼠脾细胞增殖活性;ELISA法测定脾细胞培养上清干扰素γ（IFN-γ）、胸腺细胞培养上清白细胞介素4（IL-4）、腹腔巨噬细胞培养上清肿瘤坏死因子α（TNF-α）和一氧化氮及小鼠骨髓细胞和DC2.4树突状细胞培养上清IL-12p70含量。结果ABP-50-FOS是一种果寡糖,峰高分子质量为1885 u,骨架结构为1,2-连接和1,6-连接的果糖。该寡糖能明显升高H1N1流感疫苗免疫小鼠血清特异性Ig G,Ig G2a和Ig M抗体水平（P〈0.01）,提高免疫小鼠脾CD3^＋,CD4^＋和CD8^＋T淋巴细胞亚群的百分率。体外实验表明,ABP-50-FOS能促进小鼠脾细胞增殖反应和IFN-γ分泌（P〈0.01）,促进胸腺细胞IL-4分泌（P〈0.01）,刺激腹腔巨噬细胞分泌TNF-α（P〈0.01）和DC2.4树突状细胞分泌IL-12p70（P〈0.01）,对巨噬细胞一氧化氮的分泌有抑制作用。结论牛膝果寡糖ABP-50-FOS对H1N1流感疫苗具有良好的佐剂活性,体外对小鼠免疫细胞功能具有促进作用。