补骨脂素和异补骨脂素在大鼠和人肝微粒体的酶促动力学

摘要：目的研究中药有效成分补骨脂素和异补骨脂素的细胞色素P450（CYP）酶促动力学特征,比较其结构和种属差异,为体内药代动力学特征的预测提供科学依据。方法建立补骨脂素和异补骨脂素的液相色谱串联质谱（LC-MS/MS）检测方法,在优化人和大鼠肝微粒体孵育体系和评价体外代谢稳定性的基础上,进行了代谢稳定性和酶促动力学研究,应用非线性回归法计算最大反应速率（Vmax）和米氏常数（Km）。结果应用建立的LC-MS/MS检测方法,补骨脂素、异补骨脂素在肝微粒体孵育液中定量范围为0.150.0μmol·L-1,线性关系良好,精密度和准确度等满足检测要求。体外代谢稳定性研究显示,当底物浓度为1μmol·L-1,蛋白浓度为0.5 g·L-1,孵育40 min内,补骨脂素和异补骨脂素在大鼠和人肝微粒体呈线性消除,体外半衰期分别为74.5,95.0,74.5和173.3 min。补骨脂素在大鼠和人肝微粒体中的Vmax分别为：（1.140±0.080）μmol·min-1·g-1蛋白,（0.620±0.060）μmol·min-1·g-1蛋白;Km分别为（12.9±0.3）μmol·L-1和（7.4±1.3）μmol·L-1。异补骨脂素在大鼠和人肝微粒体中的Vmax分别为（0.251±0.012）μmol·min-1·g-1蛋白和（0.103±0.014）μmol·min-1·g-1蛋白;Km分别为：（3.0±0.4）μmol·L-1和（3.4±0.7）μmol·L-1。结论补骨脂素和异补骨脂素的CYP酶促动力学特征及代谢稳定性具有一定的种属和结构差异,在大鼠两者基于CYP酶的代谢清除过程可能相似。而在人体,异补骨脂素的CYP代谢清除可能慢于补骨脂素,导致药代动力学特征的差异。