大鼠体外肝星状细胞活化过程中代谢活化相关CYP450亚型的变化

摘要：目的：观察大鼠肝星状细胞（HSC）活化不同时期外源活化相关CYP450亚型CYP1A1，CYP1B1，CYP1A2，CYP2B1/2和CYP2E1mRNA表达水平的变化规律。方法分离大鼠HSC，接种在无包被塑料培养瓶中作为HSC自氧化活化模型，免疫细胞化学法检测不同培养时间HSC活化标志物α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）表达。实时定量RT-PCR法测定HSC自氧化激活的不同时期多种外源物活化相关CYP450亚型mRNA的表达变化。结果免疫细胞化学结果表明，在塑料培养瓶中培养1d的HSC并不表达α-SMA，但随着培养时间的延长，α-SMA表达逐渐增强，培养11d的HSC处于完全活化状态，能表达典型肌丝条纹和较强α-SMA，说明培养1，2，5和11d的HSC分别处于未活化期、活化早期、中期和晚期。实时定量RT-PCR结果显示，在未活化的HSC（培养1d）中，有CYP1A1，CYP1B1，CYP1A2，CYP2B1/2和CYP2E1的mRNA表达；在HSC活化早期（培养2d），CYP1B1，CYP2B1/2，CYP2E1mRNA表达最高，分别为未活化HSC的2.1，1.6（P﹤0.05）和23.9（P﹤0.01）倍；而在活化中期（培养5d）及晚期（培养11d），这些CYP亚型表达显著降低甚至测不出。然而，CYP1A1和CYP1A2在整个活化过程均持续下降。结论多种外源物活化相关CYP450亚型在HSC自氧化激活过程发生了明显改变，其中CYP1B1，CYP2B1/2和CYP2E1的mRNA表达在活化早期显著升高，这些变化可能与HSC的早期激活增殖有关。