酸性鞘磷脂酶在二氧化硅致小鼠胚肺成纤维细胞纤维化体外模型中的作用

摘要：目的：观察酸性鞘磷脂酶（ASM）在二氧化硅（SiO2）粉尘致小鼠胚肺成纤维细胞（NIH3T3）纤维化过程中的变化及规律，探讨 ASM在硅尘致肺纤维化体外模型中的作用。方法收集 SiO2200 mg·L -1刺激小鼠原代肺泡巨噬细胞（PAM）12 h 的培养上清再刺激小鼠胚胎成纤维细胞（NIH3T3）6，12，18，24，36和48 h，ELISA 法测定 PAM培养上清中白细胞介素8（IL-8）、肿瘤坏死因子ɑ（TNF-ɑ）及转化生长因子β1（TGF-β1）的含量；高效液相色谱法测定 NIH3T3细胞内的 ASM 活性；Western 蛋白质印迹法测定NIH3T3细胞内Ⅲ型胶原蛋白质的表达。结果SiO2200 mg·L -1刺激 PAM 12 h，培养上清中 IL-8，TNF-ɑ及 TGF-β1的分泌中明显增加（P＜0．01）。PAM上清刺激 NIH3T3细胞24，36和48 h，细胞 ASM活性明显升高（P＜0．05），在36 h 达到峰值，加入地昔帕明1．25μmol·L -1细胞 ASM活性随着时间延长而显著降低。Western 蛋白质印迹法结果显示，PAM上清刺激 NIH3T3细胞24，36及48 h，细胞内Ⅲ型胶原蛋白表达明显增加（P＜0．05），在36 h 达到峰值，加入地昔帕明1．25μmol·L -1组Ⅲ型胶原蛋白表达随着时间延长而降低。结论抑制 ASM活性可能对改善肺纤维化有一定的作用。