硝基油酸对肾急性缺血再灌注模型小鼠肾的保护作用及其机制

摘要：目的探讨硝基油酸（OA-NO2）对肾急性缺血再灌注（I／R）模型小鼠肾的保护作用。方法C57小鼠分为假手术、I／R模型对照、I／R＋OA—NO2500μg·kg^-1和I／R＋油酸（OA）500μg·kg^-1组。I／R小鼠使用乙醚麻醉后，开腹采用夹闭双侧肾动脉30min，去除血管夹，再灌注24h制备肾I／R模型。I／R＋OA—NO2和I／R＋OA组在去除血管夹后分别ip给予OA-N02和OA 500μg·kg^-1，每6h注射1次。假手术和I／R模型组ip给予乙醇0．8ml·kg^-1。24h后处死小鼠，取血和肾组织，用全自动生化检测仪检测小鼠血浆尿素氮（BUN）和肌酐（Cr）水平，HE染色检测肾组织病理改变，ELISA检测血浆肿瘤坏死因子a（TNF-a）浓度，实时PCR检测肾组织细胞黏附分子1（ICAM-1）、白细胞介素1β（IL-1β）、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶胞浆亚基（P^47）和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶催化亚基（gp^91）基因表达，Western蛋白质印迹法检测肾组织TNF-a和1L-1β蛋白表达，ELISA检测肾组织丙二醛（MDA）含量。结果I／R模型组小鼠血浆BUN和Cr水平较假手术组明显增高（P〈0．01）；OA—NO2处理后，与I／R模型组比较，血浆BUN水平降低36％（P〈0．01），Cr水平降低44％（P〈0．01）；I／R＋OA组BUN和Cr水平无明显变化。I／R模型组小鼠肾组织出现肾小管上皮细胞坏死、细胞结构消失、肾小管管腔扩张和肾小管管腔管型堵塞等改变，血浆TNF-a浓度、肾组织ICAM-1，lL-1β，P^47和gP^91mRNA表达、TNF-a和1L-1β蛋白表达及MDA含量均较假手术组明显升高（P〈0．01）；应用OA—N02处理后，与I／R模型组比较，肾组织病理改变减轻，肾小管管腔扩张明显改善，未发现明显的肾小管管腔管型堵塞；血浆TNF—a浓度由I／R模型组的（590±73）ng·L^-1降低至（259±71）ng·L^-1（P〈0．01），肾组织ICAM-1，IL-1β，P^47和gp^91基因表达以及TNF-a和1L-1β蛋白表�