组蛋白去乙酰化酶抑制剂DWP0016对肺癌A549细胞和小鼠Lewis肺癌的抑制作用

摘要：目的探讨新型组蛋白去乙酰化酶（HDAC）抑制剂DWP0016对肺癌的抑制作用及可能机制。方法①体外实验：DWP0016 0.625～10μmo.lL-1作用A549细胞48 h,MTT法检测细胞存活,实时荧光定量PCR检测10号染色体同源丢失性磷酸酶张力蛋白（PTEN）mRNA水平;Western蛋白质印迹法测定总组蛋白H3,乙酰化H3（Ac-H3）,细胞周期调控因子p21,PTEN,总Akt和磷酸化Akt（p-Akt）的表达。②在体实验：小鼠腋下接种0.2 ml Lewis肿瘤细胞悬液制备肺癌模型,7 d后按照分组分别ip给予DWP001612.5,25和50 mg.kg-1及伏林司他（SAHA）50 mg.kg-1,每天1次,连续8 d。取肿瘤组织称重,计算肿瘤抑制率;免疫组化法检测肿瘤组织中Ac-H3和PTEN的表达。结果①体外实验：MTT结果显示,DWP0016抑制A549细胞增殖的IC50为2.51μmol.L-1,SAHA IC50为6.03μmol.L-1。与正常对照组相比,DWP0016 2.5μmo.l L-1组细胞组蛋白H3乙酰化及p21蛋白表达显著上升（P〈0.05）,PTEN的转录水平和蛋白水平上调,Akt的磷酸化水平下调（P〈0.05）。②在体实验：与模型组比较,给予DWP001612.5 mg.kg-1移植瘤小鼠的瘤质量显著降低（P〈0.05）,抑瘤率达42.0%,给予DWP0016 50 mg.kg-1肿瘤抑制率高于SAHA 50 mg.kg-1（P〈0.05）;与模型组比较,肿瘤组织中Ac-H3和PTEN的表达增加。结论 DWP0016能明显抑制A549细胞增殖和Lewis肺癌模型小鼠的肿瘤生长,其机制与诱导Ac-H3的表达、激活p21、促进抑癌因子PTEN的转录及下调Akt的磷酸化水平有关。