远志皂苷对β淀粉样蛋白片段1-40诱导PC12细胞凋亡的抑制作用

摘要：目的探讨远志皂苷抑制β淀粉样蛋白片段1-40（Aβ1-40）诱导的PC12细胞凋亡的作用机制。方法采用聚集状的Aβ1-40 25μmol·L-1诱导PC12细胞凋亡,然后将处理后的PC12细胞分为Aβ1-40模型组和远志皂苷50,100和200μmol·L-1组,同时设正常细胞对照组。采用MTT比色法检测细胞存活率;膜联蛋白-Ⅴ和PI双染法检测细胞凋亡率;免疫细胞化学法检测细胞凋亡基因Bcl-2和Bax及细胞色素c（Cyt c）表达阳性的细胞百分率;Western印迹法检测PC12细胞中Cyt c的表达水平。结果与正常对照组比较,Aβ1-40模型组PC12细胞的存活率明显降低（P〈0.01）,为（31±7）%;Bcl-2阳性表达细胞率降低（P〈0.01）,为（23.9±1.9）%;Bax和Cyt c阳性表达细胞率升高（P〈0.01）,分别为（79.0±3.7）%和（49.2±3.6）%,Bcl-2/Bax阳性表达细胞比值为0.30。与模型对照组比较,远志皂苷50,100和200μmol·L-1作用24 h后,细胞存活率分别升高至（51±13）%,（64±7）%和（84±10）%（P〈0.01）;Bcl-2阳性率升高至（38.7±0.9）%,（53.7±1.6）%和（60.3±0.8）%（P〈0.01）,Bax阳性率分别降低为（60.8±1.9）%,（41.5±2.2）%和（32.7±1.4）%（P〈0.01）,Bcl-2/Bax比值亦分别上升为0.64,1.29和1.84;Cyt c阳性率分别降低至（45.4±3.4）%,（30.2±2.2）%和（27.5±1.0）%（P〈0.05,P〈0.01）。与正常对照组比较,模型组PC12细胞凋亡率和Cyt c蛋白表达水平亦明显升高（P〈0.01）;远志皂苷50,100和200μmol·L-1作用24h,PC12细胞凋亡率和Cyt c表达水平较模型组均降低（P〈0.01）。结论远志皂苷对Aβ1-40诱导的PC12细胞凋亡具有明显的抑制作用,其作用机制可能是抑制Bax和Cyt c表达,增加Bcl-2表达和Bcl-2/Bax比值,从而阻断内源性细胞凋亡通路。