- · 关于变更中国毒理学会神经毒理专业委员会2020学术年会会议形式的通知[12/27]
- · 《习近平扶贫故事》——要让这世间受苦受穷的人不再贫困[12/24]
- · 中国毒理学会表观遗传毒理专业委员会成立大会暨第一次学术大会 会议通知(第二轮)[12/04]
- · 十九届五中全会公报要点[11/27]
- · 中国共产党第十九届中央委员会第五次全体会议公报[11/26]
- · 中国毒理学会神经毒理专业委员会2020学术年会[11/20]
- · 首页学术会议 会议通知 中国毒理学会2020 年度临床毒理学术年会[10/23]
- · 中国毒理学会表观遗传毒理专业委员会成立大会暨第一次学术大会会议通知[10/13]
1 《中国药理学与毒理学杂志》为军事医学科学院毒物药物研究所、中国药 理学会和中国毒理学会共同主办的学术性刊物,双月刊,国内外公开发行。编辑部设在军事医学科学院毒物药物研究所。本刊是中国中文核心期刊
...
反式激活蛋白-氧依赖性降解结构融合结构域介导蛋白跨膜转运和氧依赖性降解作用
作者: 赵宇 [1] ; 武军华 [1] ; 贾培媛 [1] ; 吴少平 [2] ; 高珊 [2] ; 王晨宇 [1] ; 黄春倩 [1] ; 王玉霞 [1]
关键词: 低氧 依赖性降解结构 TAT 增强型绿色荧光蛋白
摘要:目的研究反式激活蛋白(TAT)蛋白转导结构域介导的融合蛋白的跨膜转运,以及氧依赖性降解(ODD)结构域介导融合蛋白在体内外不同氧分压环境中的降解作用。方法将TAT,ODD以及增强绿色荧光蛋白(EGFP)基因序列进行融合,构建了TAT-ODD-EGFP融合蛋白基因。将该序列克隆到原核表达载体pET28a中,在BL21工程菌中进行表达,通过亲和柱层析法纯化,得到高纯度的融合蛋白。同方法制备EGFP和TAT-EGFP融合蛋白作为对照。在20%O2和1%O2将融合蛋白与A549,H1299和MDA-MB-231细胞系孵育,荧光显微镜下观察融合蛋白在细胞中的分布以及稳定性。小鼠尾静脉注射不同融合蛋白(10 mg.kg-1),分别在注射后1,6和12 h处死动物,取脏器在荧光显微镜下观察融合蛋白的分布及稳定性。结果由于EGFP相对分子质量大,无法穿透细胞及组织。TAT可以有效地介导TAT-EGFP进入细胞和动物实体组织,其稳定性不受细胞或组织中氧分压的影响,而TAT-ODD-EGFP进入细胞或组织后,在20%O2条件下迅速降解,但可稳定存在于1%O2细胞及组织中。结论 TAT可以有效地转导融合蛋白穿过细胞膜。引入ODD,20%O2下融合蛋白TAT-ODD-EGFP迅速降解,但可以稳定存在于1%O2细胞和组织中,说明TAT-ODD可以转导蛋白进入并靶向存在于低氧的肿瘤组织中。
上一篇:mTEL-cFms激酶结构域融合蛋白真核表达载体的构建及其对信号转导和转录激活因子核转位的影响
下一篇:依非韦伦的肝细胞毒性作用及对蛋白质表达谱的影响