- · 关于变更中国毒理学会神经毒理专业委员会2020学术年会会议形式的通知[12/27]
- · 《习近平扶贫故事》——要让这世间受苦受穷的人不再贫困[12/24]
- · 中国毒理学会表观遗传毒理专业委员会成立大会暨第一次学术大会 会议通知(第二轮)[12/04]
- · 十九届五中全会公报要点[11/27]
- · 中国共产党第十九届中央委员会第五次全体会议公报[11/26]
- · 中国毒理学会神经毒理专业委员会2020学术年会[11/20]
- · 首页学术会议 会议通知 中国毒理学会2020 年度临床毒理学术年会[10/23]
- · 中国毒理学会表观遗传毒理专业委员会成立大会暨第一次学术大会会议通知[10/13]
1 《中国药理学与毒理学杂志》为军事医学科学院毒物药物研究所、中国药 理学会和中国毒理学会共同主办的学术性刊物,双月刊,国内外公开发行。编辑部设在军事医学科学院毒物药物研究所。本刊是中国中文核心期刊
...
mTEL-cFms激酶结构域融合蛋白真核表达载体的构建及其对信号转导和转录激活因子核转位的影响
作者: 杨胜乾 ; 龙隆 ; 李微 ; 王莉莉
关键词: 巨噬细胞集落刺激因子受体 真核表达载体 TEL 豆蔻酰化 信号转导和转录激活因子 核转位 激酶抑制剂
摘要:目的构建激酶盘真核表达载体,观察豆蔻酰化的TEL转录调节因子HLH结构域与c-Fms激酶结构域融合蛋白(mTEL-cFmskd)的表达对信号转导和转录激活因子1(STAT1)和STAT3核转位的影响。方法利用DNA重组技术,将人的c-Src豆蔻酰化多肽、TEL转录调节因子HLH结构域、c-Fms激酶结构域以及c-Myc标签的DNA序列克隆在pCORON/neo载体上,构建pCORON/neo-HcSrc-Tel-cfmskd-Myc真核表达载体。将载体转染至稳定表达GFP-STAT1的人骨肉瘤细胞(U2OS)和稳定表达EGFP-STAT3的幼仓鼠肾细胞24 h后,采用IN Cell Analyzer1000获取细胞图像,分析细胞内GFP-STAT1或EGFP-STAT3融合蛋白的核转位程度。结果质粒酶切和测序鉴定表明,构建的pCORON/neo-HcSrc-Tel-cfmskd-Myc真核表达载体序列正确。载体转染细胞24 h后,绿色荧光蛋白标记的STAT1和STAT3均进入细胞核,发生核转位现象。c-Fms激酶抑制剂GW2580和Sutent能抑制mTEL-cFmskd诱导EGFP-STAT3核转位的发生。结论成功构建激酶盘真核表达载体pCORON/neo-HcSrc-Tel-cfmskd-Myc。载体在细胞中表达的mTEL-cFmskd豆蔻酰化融合蛋白具有M-CSF/c-Fms配体受体复合物激活下游信号分子的生物学功能。
上一篇:非诺贝特对凝胶包埋培养的原代大鼠肝细胞的毒性
下一篇:反式激活蛋白-氧依赖性降解结构融合结构域介导蛋白跨膜转运和氧依赖性降解作用