己烯雌酚对人肝微粒体内CYP3A4和CYP2C9酶的抑制作用

摘要：目的体外实验考察己烯雌酚（DES）对细胞色素P450 3A4（CYP3A4）和细胞色素P450 2C9（CYP2C9）活性的抑制作用,以评估DES通过抑制这两个重要的细胞色素P450（CYP）亚型而引发药物-药物相互作用的可能性。方法混合人肝微粒体与不同浓度的DES（或阳性抑制剂）、CYP3A4或CYP2C9的探针底物在37℃条件下孵育相应的反应时间后,用高效液相色谱-紫外吸收法观察探针底物的代谢产物的生成率,计算IC50值。选取不同的探针底物浓度（覆盖Km值）和DES浓度（覆盖IC50值）测定出相应的代谢速率,用Lineweaver-Burk作图和Dixon作图来判断可逆抑制类型,计算抑制动力学参数Ki。单点失活法测定DES对CYP3A4和CYP2C9是否有基于机制的抑制。结合Ki值和DES的最大血药浓度（cmax）预测体内产生的药物-药物相互作用。结果 DES对CYP3A4和CYP2C9体现出浓度依赖型的抑制,相应的IC50值分别为7.4±1.0和（3.8±0.1）μmol.L^-1。DES对CYP3A4和CYP2C9抑制的Dixon作图的交点都在第二象限,而Lineweaver-Burk作图的交点都在纵轴上,这两方面证据共同证实DES对CYP3A4和CYP2C9抑制属于竞争型抑制。CYP3A4和CYP2C9的Ki值分别为4.4和3.0μmol.L^-1。DES对CYP3A4和CYP2C9不存在基于机制的抑制。利用DES的cmax计算出对CYP3A4和CYP2C9代谢底物AUC变化倍数分别为4.3和6.2。结论 DES对CYP3A4和CYP2C9的活性有较强的抑制作用,在临床常用的剂量条件下,很容易诱导药物-药物相互作用。