银杏二萜内酯葡胺注射液通过激活Akt/Nrf2通路抑制缺糖缺氧诱导的SH-SY5Y细胞的氧化应激损伤

摘要：目的探讨银杏二萜内酯葡胺注射液（DGMI）抑制缺糖缺氧（OGD）诱导人源性神经母细胞瘤细胞（SH-SY5Y）的氧化应激损伤及其机制。方法 SH-SY5Y细胞随机分为正常细胞对照组,OGD模型组,OGD 4 h＋DGMI 25 mg·L（-1）组,OGD 4 h＋银杏叶提取物注射液（EGBLI）25 mg·L（-1）组,OGD 4 h＋银杏内酯注射液（LGBI）25 mg·L（-1）组。药物作用6 h后,CCK-8法检测细胞存活,水溶性四唑盐1（WST-1）显色法法检测SOD活性,荧光探针法（DCFH-DA）检测ROS生成,Western蛋白印迹法检测细胞内血红素加氧酶（HO-1）、醌氧化还原酶（Nqo1）、蛋白激酶B（Akt）、磷酸化Akt（p-Akt）、细胞内核因子E2相关因子2（Nrf2）、磷酸化Nrf2（p-Nrf2）的表达;OGD 4 h＋DGMI 25 mg·L（-1）组加入PI3K抑制剂LY294002（终浓度为0,12.5,25和50μmol·L（-1））,检测1 h后Akt,p-Akt,Nrf2和p-Nrf2的蛋白表达。结果与正常细胞对照组相比,OGD模型组SH-SY5Y细胞存活和SOD活性降低（P〈0.01）,ROS含量升高（P〈0.01）,降低p-Akt,Nrf2,p-Nrf2,HO-1和Nqo1的表达（P〈0.01）;与OGD模型组相比,OGD 4 h＋药物组作用6 h,细胞存活率和SOD活性显著提高（P〈0.01）,ROS含量降低（P〈0.05,P〈0.01）,p-Akt,Nrf2,p-Nrf2,HO-1和Nqo1蛋白表达水平提高（P〈0.01）,且DGMI 25 mg·L（-1）效果优于EGBLI 25 mg·L（-1）和LGBI 25 mg·L（-1）（P〈0.05,P〈0.01）;相较DGMI组,DGMI和LY294002作用1 h后p-Akt和p-Nrf2的表达被显著抑制（P〈0.01）,抑制效果呈浓度依赖性。结论 DGMI 25 mg·L（-1）对OGD诱导的SH-SY5Y细胞具有抗氧化保护作用,其机制可能与激活Akt/Nrf2通路有关。