孕期尼古丁暴露子代大鼠饲喂高脂饮食对下丘脑-垂体-肾上腺轴敏感性的影响及发生机制

摘要：目的观察孕期尼古丁暴露（PNE）所致子代大鼠高脂饮食下下丘脑-垂体-肾上腺（HPA）轴应激高敏感性改变,并探讨其发生机制。方法受孕Wistar大鼠从孕9-20 d sc给予尼古丁2 mg·kg-1。自然出生仔鼠断奶后给予高脂饮食喂养至20周（PW20）,其中一半仔鼠从PW17至PW20给予3周不可预计性慢性刺激（UCS）。HE染色观察组织形态学改变,放免试剂盒和ELISA分别检测大鼠血清促肾上腺皮质激素（ACTH）及皮质酮（CORT）水平,PCR检测ACTH释放激素（CRH）、精氨酸加压素（AVP）、囊泡谷氨酸转运蛋白2（VGlu T2）、谷氨酸脱羧酶65（GAD65）、盐皮质激素受体（MR）、糖皮质激素受体（GR）和谷氨酸脱羧酶67（GAD67）等相关基因的m RNA表达。结果正常对照组雌、雄仔大鼠经UCS刺激后,血清ACTH和CORT分别升高了1.96倍（P〈0.01）,1.63倍（P〈0.01）和3.24倍（P〈0.01）,3.54倍（P〈0.01）,PNE组雌、雄仔大鼠经UCS刺激后,血清ACTH和CORT分别升高了3.96倍（P〈0.01）,3.04倍（P〈0.01）和5.98倍（P〈0.01）,5.22倍（P〈0.01）。与UCS处理的正常对照组仔大鼠相比,UCS处理的PNE组雌、雄仔大鼠下丘脑AVP m RNA表达分别升高了2.04倍（P〈0.01）和1.13倍（P〈0.05）,雌性下丘脑CRH m RNA表达和VGlu T2/GAD65 m RNA比值分别升高了2.49倍（P〈0.01）和1.14倍（P〈0.01）。全部PNE组雌、雄仔大鼠海马各区均出现不同程度的病理损伤,表现为神经元数量减少、排列稀疏和细胞间隙增大。与无UCS处理的正常对照组相比,无UCS处理的PNE雌、雄仔大鼠海马MR/GR m RNA比值分别降低了88.0%和86.0%（P〈0.01）,GAD67 m RNA表达分别升高了1.38倍和1.97倍（P〈0.05）;与UCS处理的正常对照组相比,UCS处理的PNE组雌性仔大鼠海马GAD67 m RNA表达升高了2.17倍（P〈0.05）。结论 PNE可致高脂饮食成年子代大鼠HPA轴应激高敏感性发生,其机制可能与海马MR/GR比值失衡、GAD67表达上调