满天星异荭草苷对人肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的调控作用机制

摘要：目的研究满天星异荭草苷对人肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制。方法满天星异荭草苷5,10,20,40,80和160μmol·L^-1作用于HepG2细胞24,48和72h后,用MTT法检测细胞存活率。满天星异荭草苷5,10和20μmol·L^-1作用细胞48 h,检测细胞内乳酸脱氢酶（LDH）的释放量;作用24 h,荧光探针H2DCF-DA测定细胞内活性氧（ROS）含量,流式细胞仪检测HepG2细胞凋亡和线粒体膜电位,比色法检测胱天蛋白酶3,8和9的活性,RT-PCR检测Bcl-2和Bax m RNA的表达;Western蛋白印迹法检测Bcl-2,Bax和细胞色素c蛋白的表达。结果满天星异荭草苷浓度依赖性地（5-160μmol·L^-1）抑制HepG2细胞存活,作用24,48和72 h时IC50分别为62.7±9.1,47.2±11.4和（18.2±7.5）μmol·L^-1。与细胞对照组相比,满天星异荭草苷5,10和20μmol·L^-1能明显提高LDH水平和细胞凋亡率（P〈0.05）,10和20μmol·L^-1可显著促进ROS的产生,降低线粒体膜电位,并增强胱天蛋白酶3和9的活性;RT-PCR和Western蛋白印迹结果表明,满天星异荭草苷能明显降低Bcl-2 m RNA和蛋白的表达,但升高Bax m RNA和蛋白表达（P〈0.05）,降低细胞色素c蛋白表达（P〈0.05）。结论满天星异荭草苷抑制HepG2细胞增殖,促进其凋亡,该作用与线粒体凋亡途径密切相关。