阿魏酸对脊髓损伤大鼠微管相关蛋白轻链3、Beclin1、Bcl-2和Bax表达的影响

摘要：目的研究阿魏酸（FA）对脊髓损伤（SCI）模型大鼠的改善作用及其对微管相关蛋白轻链3（LC3）、人卷曲螺旋肌球蛋白样BCL-2结合蛋白/自噬基因1（Beclin1）、Bcl-2和Bax表达的影响。方法采用脊髓压迫损伤动物模型,即动脉钳夹闭脊髓2 min造成SCI。实验分为假手术组、模型6 h,1,3,7和14 d组、FA 100 mg·kg（-1）（术后po,每天2次）给药6 h,1,3,7和14 d组。SCI后,进行BBB评分和斜板功能评分,随后处死大鼠,取脊髓进行HE染色,采用免疫组织染色法检测LC3和Beclin1蛋白,采用Western蛋白印迹法检测LC-3,Beclin1,Bcl-2和Bax蛋白表达。结果与假手术组相比,模型6 h组BBB评分和斜板功能评分明显下降,分别由21分和70°下降为（0.5±0.5）分和（5.8±2.0）°;而FA给药7 d后BBB评分由模型7 d组的3.0±1.7上升为6.2±3.6（P〈0.05）,斜板功能评分则由（13.3±4.1）°上升为（26.7±8.7）°（P〈0.01）;HE染色发现,SCI损伤后出现组织水肿,结构呈空洞状;FA给药7-14 d,脊髓内部水肿及结构空洞得到改善。Western蛋白印迹法检测结果显示,SCI损伤后1 d,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ和Beclin1表达增加（P〈0.01）,14 d组蛋白表达相比于1 d组下降（P〈0.05）;相对于自噬蛋白,抗凋亡蛋白Bcl-2表达增加,并且Bcl-2与致凋亡蛋白Bax的比值增加（P〈0.05）。SCI损伤后给予FA,相比于SCI模型组,1 d组LC3和Beclin1表达增加（P〈0.05）;14 d组Bcl-2表达明显增加,其与Bax比值增加更为显著（P〈0.05）。结论 SCI后可能存在着自噬先增强后减弱的发展过程,而抗凋亡作用可能存在着逐渐增强的趋势。FA对SCI具有潜在的治疗作用,其机制可能涉及对自噬和凋亡的影响。