邻苯二甲酸单乙基己基酯对神经干细胞增殖和迁移的作用

摘要：目的探讨邻苯二甲酸单乙基己基酯（MEHP）对原代神经干细胞（NSC）和NE-4C小鼠细胞增殖和迁移的影响。方法原代NSC来源于孕15 d（E15）远交群SD胎大鼠脑皮质;NE-4C细胞为小鼠NSC。MEHP 0,1,10,100和1000μmol·L^-1处理72 h后,CCK-8法检测细胞活力;5-乙炔基-2′脱氧尿嘧啶核苷（Ed U）法检测细胞增殖能力;Transwell小室检测细胞迁移;Western蛋白印迹法检测糖皮质激素受体（GR）、Y性别决定区框2（Sox2）、信号传导与转录激活因子3（Stat3）等基因及蛋白的表达。结果 CCK-8结果显示,与正常对照组相比,MEHP1000μmol·L^-1作用72 h后,NE-4C和NSC细胞活力明显减弱,分别为正常对照组的70.3%和40.0%。Ed U结果显示,与正常对照组相比,MEHP 100μmol·L^-1组细胞增殖率降低,分别为正常对照组的74.8%和12.0%（P〈0.05）。Transwell实验发现,MEHP 100μmol·L^-1处理72 h后,NE-4C细胞的迁移率降低至（63.4±2.0）%（P〈0.05）。MEHP 100μmol·L^-1组NE-4C中与增殖和迁移相关的基因GR,Stat3和Sox2的表达下调,分别为正常对照组的49.8%,26.0%和14.0%（P〈0.05）;在NSC中的相应基因也下调,分别为正常对照组的10.0%,14.0%和15.3%;在NE-4C中与增殖及迁移相关的蛋白GR,GRβ,p-Stat3和Sox2的表达下调,相对表达量分别为0.92±0.17,0.87±0.35,0.62±0.24和0.81±0.22（P〈0.05）;在NSC中相应蛋白表达也下调,相对表达量分别为0.82±0.20,0.56±0.12,0.53±0.20和0.84±0.36（P〈0.05）。结论大剂量MEHP可抑制NSC的增殖和迁移能力,其机制可能是通过GR介导的Stat3及Sox2的作用实现。