盐酸法舒地尔对体外培养星形胶质细胞氧糖剥夺损伤的保护作用

摘要：目的研究盐酸法舒地尔（FH）对大鼠皮质星形胶质细胞氧糖剥夺损伤（OGD）的保护作用。方法传代培养的大鼠皮质星形胶质细胞与无糖Na2S2O42 mmol·L-1孵育4 h,制备OGD模型。FH 5和10μmol·L-1在OGD前2 h加入。采用噻唑蓝（MTT）法检测细胞存活;比色法检测乳酸脱氢酶（LDH）;乙炔基脱氧尿苷（Ed U）掺入法检测星形胶质细胞DNA合成;Hoechst染色和丫啶橙（AO）/溴化乙啶（EB）荧光双染观察细胞凋亡;2,7-二氯氢化荧光素（DHCF-DA）荧光染色和硝基四氮唑蓝（NBT）还原实验检测细胞内活性氧（ROS）水平。结果与正常对照组比较,OGD模型组星形胶质细胞存活率为（24±6）%,下降了4倍（P〈0.01）;OGD模型组LDH释放量显著升高至（366±7）U·L-1（P〈0.01）。加入FH 5和10μmol·L-1的预处理组,细胞存活率分别上升至（42±5）%和（43±5）%,LDH释放分别下降至290±18和（268±20）U·L-1（P〈0.01）,细胞Ed U阳性率由OGD模型组的（47±6）%,分别下降到（35±6）%和（29±5）%（P〈0.01）。Hoechst染色及AO/EB双染实验结显示,FH能显著减少OGD损伤后细胞的凋亡及坏死,使晚期凋亡细胞比例减少（P〈0.05）;DCFH-DA荧光和NBT还原实验显示,FH降低OGD损伤后ROS水平,且FH10μmol·L-1的预处理组降低的幅度比5μmol·L-1的预处理组更明显,但两组差异无统计学意义。结论FH对传代培养的大鼠皮质星形胶质细胞OGD具有保护作用,其作用机制可能与降低细胞内ROS水平有关。