糖网明目颗粒对缺氧/高糖状态下血管内皮细胞相关因子表达的影响

摘要：目的观察糖网明目颗粒（TWK）对缺氧/高糖状态下血管内皮细胞EA.hy926相关因子的影响。方法用Co Cl250μmol·L-1和葡萄糖40 mmol·L-1干预人脐静脉内皮细胞EA.hy926复制缺氧和高糖模型;分别给予TWK 1.0和2.5 g·L-1干预24 h,MTT法检测细胞存活率;半定量逆转录（RT）-PCR法检测缺氧诱导因子1α（HIF-1α）、血管内皮细胞生长因子受体2（VEGFR-2）和细胞间黏附分子1（ICAM-1）基因表达;ELISA法检测HIF-1α,VEGFR-2和ICAM-1蛋白含量。结果缺氧和高糖均能使EA.hy926细胞存活率升高,显著上调HIF-1α,VEGFR-2和ICAM-1 mRNA表达和蛋白含量（P〈0.05）。TWK干预后,与模型组比较,细胞存活率显著下降,HIF-1α,VEGFR-2和ICAM-1 mRNA水平和蛋白含量显著降低（P〈0.05）,并且随着浓度的增加,药效有增强的趋势,但差异无统计学意义。TWK 2.5 g·L-1使缺氧细胞存活率由（109.9±6.9）%降至（69.6±2.2）%（P〈0.05）;HIF-1α,VEGFR-2和ICAM-1基因表达分别由0.292±0.017,0.210±0.013和0.724±0.027降低至0.204±0.014,0.061±0.010和0.476±0.018（P〈0.05）;HIF-1α,VEGFR-2和ICAM-1蛋白含量分别由56.2±4.9,1756±145和（339±33）ng·L-1降低至38.4±1.5,1057±118和（226±15）ng·L-1（P〈0.05）。TWK 2.5 g·L-1使高糖细胞存活率由（111.4±7.3）%下降至（70.5±2.9）%（n=5,P〈0.05）;HIF-1α,VEGFR-2和ICAM-1 mRNA表达分别由0.397±0.021,0.289±0.034和0.755±0.031降低至0.247±0.015,0.079±0.005和0.531±0.025（P〈0.05）;HIF-1α,VEGFR-2和ICAM-1蛋白含量分别由56±4,1824±179和（339±31）ng·L-1降低至37±1,1170±110和（260±19）ng·L-1（P〈0.05）。TWK 1.0 g·L-1也具有同样的作用效果。结论 TWK可能是通过调控内皮细胞HIF-1α,VEGFR-2和ICAM-1等新生血管相关因子的mRNA表达和蛋白分泌从而发挥防治糖尿病视网膜病变的作用。