姜黄素通过抑制糖皮质激素受体促进大鼠神经干细胞增殖

摘要：目的探讨姜黄素对大鼠神经干细胞增殖的影响及其可能机制。方法取孕15 d（E15）远交群（SD）大鼠的胎脑皮质,分离培养原代神经干细胞,进行神经干细胞标志蛋白神经上皮干细胞蛋白巢蛋白（nestin）和胚胎干细胞关键蛋白（SOX2）染色鉴定。姜黄素0,0.1,0.5,2.5,12.5和62.5μmol·L-1处理大鼠神经干细胞24 h后,乳酸脱氢酶（LDH）释放法检测细胞毒性;MTT法检测细胞存活;5-溴脱氧尿嘧啶核苷（Brd U）增殖试剂盒检测神经干细胞增殖;荧光定量聚合酶链反应法（q RT-PCR）检测神经干细胞糖皮质激素受体（GR）、信号转导与激活因子3（Stat3）、Notch1和p21 m RNA表达;Western蛋白印迹法检测神经干细胞GR,Stat3和磷酸化Stat3（p-Stat3）蛋白表达。结果原代细胞经巢蛋白和SOX2蛋白染色鉴定为神经干细胞。LDH释放法检测结果显示,姜黄素12.5和62.5μmol·L-1对神经干细胞具有细胞毒性作用（P〈0.05）。MTT结果显示,姜黄素0.5和2.5μmol·L-1增强神经干细胞活力,姜黄素62.5μmol·L-1降低神经干细胞活力（P〈0.05）。Brd U结果显示,姜黄素0.1,0.5和2.5μmol·L-1促进神经干细胞增殖（P〈0.05）,姜黄素12.5和62.5μmol·L-1抑制神经干细胞增殖（P〈0.05）。q RT-PCR结果显示,姜黄素0.5μmol·L-1组GR m RNA表达明显降低（P〈0.05）。Western蛋白印迹法结果表明,姜黄素0.5μmol·L-1组GR,Stat3和p-Stat3蛋白表达明显降低（P〈0.05）。结论姜黄素促进神经干细胞增殖,可能与其抑制GR m RNA转录及相关蛋白表达有关。