一氧化氮在双氯芬酸钠致大鼠急性肝损伤中的作用

摘要：目的探讨一氧化氮（NO）在双氯芬酸钠（DCF）诱导大鼠急性肝损伤中的作用。方法大鼠随机分为正常对照、DCF模型、DCF＋N-硝基-L-精氨酸甲酯（L—NAME）2，10和50mg·kg^-1组。DCF模型组大鼠一次性ip给予DCF00mg·kg^-1，DCF＋L—NAME组大鼠在给予DCF前10rain一次性ip给予L-NAME。给药24h后处死大鼠，制备血清，用全自动生化分析仪检测谷丙转氨酶（GPT）、谷草转氨酶（GOT）和总胆红素（TBIL）水平，化学法检测NO水平。同时制备肝组织匀浆，用化学法检测NO水平，黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶（SOD）活性，硫代巴比妥酸法测定丙二醛（MDA）含量，四甲基联苯胺法测定髓过氧化物酶（MPO）活性，Eutler改良法检测还原型谷胱甘肽（GSH）含量，酶促法检测GSH过氧化物酶（GSH—Px）活性。HE染色观察肝组织病理变化。免疫组化法检测肝组织诱导型一氧化氮合酶（iNOS）蛋白表达。提取肝细胞线粒体，硫酸甲酯吩嗪反应法检测琥珀酸脱氢酶（SDH）活性，用紫外可见分光光度计检测ATP酶活性，自体荧光光度计检测还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NADH）水平，罗丹明123法检测膜电位，线粒体肿胀度采用在520nm处吸光度降低值表示。结果与正常对照组比较，DCF模型组血清GPT，GOT和TBIL水平明显升高（P〈0．05），血清和肝匀浆NO水平升高（P〈0．01）。肝组织iNOS蛋白表达增强（P〈0．01）。组织病理观察发现，肝细胞肿胀坏死，炎症细胞浸润。肝匀浆内MDA（P〈0．01）和MPO（P〈0．05）含量增高，GSH含量（P〈0．01），GSH—Px（P〈0．05）和SOD（P〈0．01）活性降低。肝细胞线粒体NADH水平、SDH及ATP酶活性明显降低（P〈0．01），同时线粒体膜电位异常，肿胀的敏感性下降。与模型组比较，L-NAME2，10和50mg·kg^-1组血清GPT，GOT和TBIL水平降低，血清和肝匀浆NO含量减低（P〈0．05）�