豹皮樟总黄酮体外对酒精性脂肪肝大鼠肝细胞脂肪变性的影响

摘要：目的 探讨豹皮樟总黄酮（ＴＦＬＣ）对酒精性脂肪肝（ＡＦＬ）大鼠肝细胞脂肪变性的影响。方法大鼠自由饮用含乙醇饮料，起始浓度为 ５％，依次增加为 １０％，１５％，２０％，２５％，３０％和 ３５％，每个浓度持续 １周，第８周 ～第１２周浓度为４０％的方法制备大鼠 ＡＦＬ模型，原位二步灌流法分离 ＡＦＬ大鼠肝细胞，用细胞角蛋白 １８（ＣＫ１８）抗体进行肝细胞鉴定。肝细胞培养 １６ｈ后加入 ＴＦＬＣ１，１０和 １００ｍｇ·Ｌ－１或谷胱甘肽（ＧＳＨ）１０ｍｍｏ·ｌＬ－１孵育 ４８ｈ。ＭＴＴ法测定肝细胞存活，用试剂盒方法检测肝细胞丙氨酸转氨酶（ＡＬＴ）和天冬氨酸转氨酶（ＡＳＴ）活性以及肝细胞内甘油三酯（ＴＧ）含量，免疫组化和 ＲＴＰＣＲ方法测定脂肪分化相关蛋白（ＡＤＲＰ）、过氧化物酶体增殖物激活受体 γ（ＰＰＡＲγ）ｍＲＮＡ和蛋白表达的变化。结果ＴＦＬＣ对正常大鼠肝细胞存活无明显影响。ＴＦＬＣ１００ｍｇ·Ｌ－１明显增加 ＡＦＬ大鼠肝细胞存活（Ｐ＜０．０５）。ＡＦＬ大鼠肝细胞培养液 ＡＬＴ和 ＡＳＴ活性分别为６３±１２和（７４±１９）Ｕ·Ｌ－１，ＴＦＬＣ１０和１００ｍｇ·Ｌ－１分别将ＡＬＴ活性降低到４２±１２和（４４±８）Ｕ·Ｌ－１（Ｐ＜０．０５），将 ＡＳＴ活性降低到 ４６±１４和（４７±８）Ｕ·Ｌ－１（Ｐ＜０．０５）。ＡＦＬ大鼠肝细胞内 ＴＧ含量为（２．３±０．６）ｍｍｏ·ｌＬ－１，ＴＦＬＣ１０和 １００ｍｇ·Ｌ－１分别将 ＡＦＬ肝细胞内 ＴＧ含量降低到 １．４±０．３和（１．５±０．５）ｍｍｏ·ｌＬ－１（Ｐ＜０．０５）。ＡＦＬ肝细胞 ＡＤＲＰ和 ＰＰＡＲγ阳性表达细胞分别为（４１±６）％和（３７±１０�