雪胆素乙通过破坏微丝结构和促进p21Cip1表达抑制前列腺癌PC-3细胞的增殖

摘要：目的分析雪胆素乙（CuⅡb）对人前列腺癌PC-3细胞增殖及细胞周期的影响，探讨其作用机制。方法MTS法检测CuⅡb0．064～200μmol·L-1作用48h后PC-3细胞增殖；CuⅡb2和20μmol·L-1作用24h，相差显微镜观察细胞形态；CuⅡb2和20μmol·L-1作用48h，流式细胞术分析细胞周期分布；免疫荧光染色分析CuⅡb20tzmol·L一分别作用1，4和24h后微丝和微管细胞骨架变化；免疫印迹法测定CuⅡb20μmol·L-1分别作用1，4和24h后G肌动蛋白、F肌动蛋白、p21Cipl及细胞周期蛋白A，B1，E和D1的表达。结果CuⅡb以浓度依赖方式抑制PC-3细胞的增殖（r=0．9817，P〈0．05）。CuⅡb20μmol·L-1作用48h，使细胞周期阻滞于G2／M期，从溶剂对照组的（27．7±1．5）％上升为（45．3±1．8）％（P〈0．01），相差显微镜见细胞发生明显收缩。CuⅡb20μmo·L-1作用24h，使G肌动蛋白水平显著下降，F肌动蛋白发生严重聚集（P〈0．05），而对微管只有轻微影响。与溶剂对照组相比，cuⅡb20μmol·L-1作用24h后，细胞p21Cipl表达明显升高，细胞周期蛋白A表达显著下调，其他细胞周期蛋白表达上调（P〈0．05）。结论CuⅡb能明显抑制人前列腺癌PC-3细胞的增殖，其机制可能是通过诱导肌动蛋白聚集，破坏微丝骨架，促进抑癌因子p210iPl表；大阳滞细胎周期的讲程。