碱性成纤维细胞生长因子团聚体对糖尿病大鼠外周神经病变的治疗作用

摘要：目的探究新型生物材料碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）团聚体对糖尿病大鼠坐骨神经病变的治疗作用。方法将聚乙烯精氨酸天冬氨酸甘油二酯（PEAD）、肝素和bFGF按50∶10∶1（m/m/m）的比例混合,制备成bFGF团聚体。Western蛋白印迹法检测该团聚体中bFGF含量,ELISA法检测团聚体中bFGF释放速率。雄性SD大鼠ip给予链脲佐菌素制备糖尿病大鼠模型,继续饲养8周使之发生外周神经病变,随机分为空载体组、bFGF治疗组和bFGF团聚体治疗组。bFGF治疗组每天im给予bFGF 200μg·kg~（-1）,连续3 d;bFGF团聚体治疗组一次性im给予含等量bFGF的团聚体12.2 mg·kg~（-1）;空载体组给予等体积的空载体（PEAD＋肝素）。每周测量后肢足步印迹进行坐骨神经功能指数（SFI）的行为学评分。给药后第30天处死大鼠,收集两侧坐骨神经,HE染色进行病理学观察,DAPI荧光染色检测神经组织内细胞凋亡,Western蛋白印迹法检测细胞增殖标志物Ki67和增殖细胞核抗原（PCNA）蛋白水平。结果 PEAD、肝素和bFGF按50∶10∶1配比制备的bFGF团聚体结合bFGF良好;ELISA释放曲线结果表明,该团聚体可缓释bFGF。大鼠行为学评价和病理指标检测结果显示,与正常对照组比较,空载体组大鼠SFI显著减小（P〈0.01）,神经纤维排列紊乱且内部脱髓鞘情况严重,而且组织内部细胞凋亡明显,Ki67和PCNA蛋白表达水平显著下降（P〈0.01）。与空载体组比较,bFGF治疗组和bFGF团聚体治疗组SFI升高（P〈0.05,P〈0.01）,神经纤维排列紊乱和内部脱髓鞘现象改善,组织内部细胞凋亡减少,且Ki67和PCNA蛋白表达显著增加（P〈0.01）。与bFGF治疗组相比,bFGF团聚体治疗组SFI在治疗后第28天升高更加明显（P〈0.05）,神经纤维排列规整,脱髓鞘现象基本消失,组织内部细胞核的荧光强度与形态基本接近正常,Ki67和PCNA蛋白表达水平显著升高（P〈0.05）。结论新型生物材�