补骨脂酚及其与补骨脂素合用对HK-2细胞的毒性及其机制

摘要：目的研究补骨脂酚（bakuchiol）及补骨脂酚与补骨脂素（psoralen）合用的肾细胞毒性,并初步探讨其毒性机制。方法采用人肾近曲小管上皮细胞（HK-2）,研究补骨脂酚、补骨脂酚与补骨脂素合用以及在大鼠肝匀浆S9作用下,对HK-2细胞的毒性作用。实验分为空白对照、溶剂对照、阳性对照马兜铃酸Ⅰ（AAⅠ）、补骨脂素5μmol.L^-1、补骨脂酚5,10,20,30和40μmol.L^-1,补骨脂酚与补骨脂素合用（20＋5）,（30＋5）,（40＋5）μmo.lL^-1组。MTT法检测细胞存活率;乳酸脱氢酶（LDH）释放实验检测细胞膜损伤;倒置显微镜观察细胞形态改变;AnnexinⅤ/PI染色法检测细胞凋亡;PI染色法检测细胞周期。结果补骨脂素5μmol.L^-1作用于HK-2细胞,未观测到毒性作用;补骨脂酚、补骨脂酚与补骨脂素合用分别与HK-2细胞作用4,24,48和72h,在较高浓度下（20,30和40μmol.L^-1）细胞存活被明显抑制（P〈0.01）,补骨脂酚24,48和72h的IC50值分别为（26.4±4.8）,（21.8±0.6）和（24.1±0.8）μmol.L^-1;在大鼠肝匀浆S9作用下,补骨脂酚的细胞毒性明显降低（P〈0.01）。较高浓度（30和40μmol.L^-1）的补骨脂酚、补骨脂酚与补骨脂素合用分别与HK-2细胞作用24h,LDH的释放率明显增高（P〈0.01）,呈浓度依赖性;倒置显微镜下观察细胞形态变化,HK-2细胞随着浓度的增高,作用时间的延长,细胞收缩、变小变圆和破裂脱落现象越明显。补骨脂酚40μmol.L^-1、补骨脂酚与补骨脂素合用（20＋5）,（30＋5）和（40＋5）μmol.L^-1可诱导HK-2细胞发生不同程度的凋亡,并且引起明显的细胞死亡。补骨脂酚10,20,30和40μmol.L^-1、补骨脂酚与补骨脂素合用均影响细胞周期,主要表现为G2期减少,G1和S期增加或减少。结论补骨脂酚对HK-2细胞有明显的毒性,与补骨脂素合用不能降低其毒性,经大鼠肝匀浆S9作用后,补骨脂酚的细胞毒性明显降低。补骨脂酚对HK-2细胞�