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1 《中国药理学与毒理学杂志》为军事医学科学院毒物药物研究所、中国药 理学会和中国毒理学会共同主办的学术性刊物,双月刊,国内外公开发行。编辑部设在军事医学科学院毒物药物研究所。本刊是中国中文核心期刊
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二氢杨梅素通过上调自噬活性抑制MPP+诱导的PC12细胞损伤
作者: 周湘华 [1] 赵其辉 [1] 周寿红 [2]
关键词: 二氢杨梅素 1-甲基-4-苯基吡啶离子 PC12细胞 细胞增殖 自噬
摘要:目的 观察二氢杨梅素(DMY)对1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP+)诱导的PC12细胞损伤的影响并探讨其可能的机制.方法 含DMY 5,10,20,40和80μmol·L-1的培养液预处理PC12细胞0.5 h,培养液中加入自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)10 mmol·L-1,再加入MPP+500μmol·L-1培养48 h.噻唑蓝(MTT)法检测细胞存活,丙酮酸二硝基苯腙比色法检测细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)水平,透射电镜观察细胞的超微结构,Western蛋白质印迹法检测细胞中自噬相关蛋白Beclin-1和微管相关蛋白1轻链3(LC3)和P62的表达.结果 与细胞对照组比较,MPP+组细胞存活率显著降低(P<0.05),细胞培养液中LDH水平显著增加(P<0.05),细胞中自噬体的数量明显减少,自噬泡占胞质总面积的百分率显著降低(P<0.05),LC3-Ⅱ和Beclin-1的蛋白表达及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的比值均显著降低(均P<0.05),P62的表达显著升高(P<0.05).与MPP+组比较,MPP++DMY 10~80μmol·L-1组细胞存活率显著升高(P<0.05),细胞培养液中LDH水平显著降低(P<0.05).与MPP+组比较,MPP++DMY 20μmol·L-1组细胞中自噬体数量明显增加,自噬泡占胞质总面积的百分率显著增加(P<0.05),LC3-Ⅱ和Beclin-1的蛋白表达和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的比值均显著增加(P<0.05),P62的表达显著降低(P<0.05).与MPP++DMY 20μmol·L-1组比较,MPP++DMY+3-MA组细胞存活率显著降低(P<0.05),细胞上清液中LDH水平显著增加(P<0.05).结论 DMY抑制MPP+诱导的PC12细胞损伤,其机制与上调细胞自噬活性有关.
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